CD204阴性人脂肪来源细胞体外成软骨潜能的初步研究

• 作者: 丁金萍 刘伟 周广东 孙恒赟 张文杰 曹谊林 陈谨君
• 来源期刊: 组织工程与重建外科杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: CD204(巨噬细胞清道夫受体) 脂肪组织来源干细胞 软骨潜能 细胞分选
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-5
• 分类号: Q813.1+1
• 字数: 3578字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2012.01.001

摘要

目的 比较CD204+和CD204-两种人脂肪来源细胞的干细胞特性和体外诱导成软骨的能力.方法 分离培养人脂肪来源细胞并进行流式细胞分选,分别获得CD204+和CD204-两种细胞.将这两种细胞培养扩增至第2代,观察其形态学特点；成脂、成骨定向诱导分化,油红O染色、茜素红染色定性；同时将两种细胞进行pellet成软骨诱导分化,比较体外诱导成软骨的能力,并以HE、Safranin O和Ⅱ型胶原免疫组化染色等进行鉴定.结果 经流式细胞分选,脂肪来源细胞中CD204表达阳性率约为10％.分选后的CD204+和CD204-细胞均呈成纤维细胞样贴壁生长,但CD204-细胞具有更强的增殖能力.成脂诱导10d后,两组细胞油红O染色均可见胞浆内有大量红染脂滴,但 CD204+细胞具有更强的成脂潜能.成骨诱导2周后,两组细胞茜素红染色均可见钙结节红染,而CD204-细胞具有更强的成骨潜能.同时,细胞pellet成软骨诱导4周后,大体观可见CD204-细胞组pellet形成白色透明样软骨成分,而CD204+细胞组pellet外观微黄.HE和Ⅱ型胶原免疫组化染色均显示CD204-组pellet可见成熟软骨陷窝形成,SafraninO染色显示CD204-组软骨特异性细胞外基质沉积；而CD204+细胞组pellet则呈纤维化改变.结论 脂肪组织来源的CD204-细胞具有干细胞的生物学特点,且有良好的成软骨潜能,可以成为软骨组织工程良好的种子细胞来源.