胱抑素C的IgG-和IgY-ELISA检测体系的建立与评价

• 作者: 代爽 刘雯雯 吴啟洪 吴永琴 李敏惠 杨平 杨艳玲 王琦 蒋洪娇 邓未 邹强
• 来源期刊: 成都医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: IgY抗体 IgG抗体 胱抑素C 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 386-389
• 分类号: R743.305
• 字数: 2478字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-2257.2012.03.013

摘要

目的 建立适用于检测人胱抑素C(Cystatin C)的IgG与IgY双抗体夹心ELISA检测体系.方法 以人Cystatin C作为抗原免疫产蛋的罗曼鸡和新西兰兔,纯化抗Cystatin C的鸡抗体IgY和兔抗体IgG,并分别建立三种ELISA夹心检测体系,Ⅰ:捕捉抗体IgG+检测抗体IgY+抗鸡IgY酶标抗体；Ⅱ:捕捉抗体IgG+检测抗体IgY+兔F(ab)2抗鸡酶标抗体；Ⅲ:捕捉抗体IgY+检测抗体IgG+抗兔IgG酶标抗体.通过比较Cystatin C的最低检测浓度和阴性对照的OD值评价三种夹心法的灵敏度和特异性.结果 体系Ⅰ的Cystatin C最低检测浓度为7.5 ng/mL(阴性对照OD值为0.737),体系Ⅱ的Cystatin C最低检测浓度为13 ng/mL(阴性对照OD值为0.313),体系Ⅲ的Cystatin C最低检测浓度为10 ng/mL(阴性对照OD值为0.31).结论 成功建立了Cystatin C的双抗体夹心ELISA检测体系,体系Ⅰ的灵敏度最高但其特异性差,体系Ⅱ和Ⅲ的检测灵敏度和特异性均较好,可以用于Cystatin C的检测.