saRNA在转录水平激活人膀胱癌细胞p21WAF1/CIP1的表达研究

• 作者: 叶章群 吴嘉 张勇 徐华 李龙承 杨为民 王骥 胡嘏 郭小林 陈忠
• 来源期刊: 现代泌尿生殖肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA激活 小激活RNA p21前体mRNA RNA聚合酶Ⅱ p21启动子
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 165-168,173
• 分类号: R737.14
• 字数: 3289字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1674-4624.2012.03.012

摘要

目的 探讨小激活RNA-dsP21-322上调人膀胱癌细胞系T24中抑癌基因p21WAF1/CIP1(p21)表达的效应.进一步分析dsP21-322是否还可上调p21前体mRNA的表达,以及增强RNA聚合酶Ⅱ蛋白与dsP21-322靶向的p21启动子区的联系.方法 合成靶向p21启动子区的小激活RNA序列dsP21-322及阴性对照(dsControl),并分别转染至T24细胞,RT-qPCR和Western Blot分别检测p21 mRNA、前体mRNA和蛋白表达的变化.ChIP检测RNA聚合酶Ⅱ蛋白与dsP21-322靶向的p21启动子富集的改变.结果 RT-qPCR和Western Blot结果显示,dsP21-322可以明显上调T24细胞系中p21成熟mRNA、前体mRNA及p21蛋白的表达,且与dsControl相比,差异均有统计学意义(P<0.001).此外,dsP21-322的转染可以明显增强RNA聚合酶Ⅱ蛋白与dsP21-322靶向的p21启动子区的联系.结论 dsP21-322上调抑癌基因p21表达是发生在转录水平的基因调控过程,这一特征的发现为后续RNA激活机制的研究提供了部分理论依据.