人脂肪来源干细胞与胶原支架共培养的实验研究

• 作者: 卢慕峻 吴稼晟 周哲 孙康 张明 徐明曦 李伟 王忠 赵阳
• 来源期刊: 组织工程与重建外科杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 脂肪来源干细胞 胶原 支架 组织工程
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 189-194
• 分类号: Q813.1+1
• 字数: 3771字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0364.2012.04.003

摘要

目的 观察评价人脂肪来源干细胞(Human adipose derived stem cells,hADSCs)在胶原支架中的生长情况,为进一步体内组织修复研究提供依据.方法 取人抽脂术后脂肪,经胶原酶解、过滤、离心获得hADSCs,代传代扩增后,接种到胶原支架上.细胞-材料复合物分别体外培养1周、2周,裸鼠体内培养2周、4周后,HE染色观察细胞在支架上的生长情况,免疫组化HLA-I检测经裸鼠体内培养后的复合物上的细胞的种属来源.结果 原代培养的hADSCs呈“梭形”或“成纤维细胞”样,并以克隆团形式生长.免疫荧光Vimentin染色阳性.第3代hADSCs经流式细胞鉴定,CD29、CD44、CD105表达阳性,CD45、CD34表达阴性.胶原支架复合hADSCs经过体外、体内培养,hADSCs均能长入胶原支架的空隙内,且体内培养比体外培养有更多的细胞长入支架.体外培养1周,已有细胞粘附生长在胶原支架的边缘,体外培养2周后,更多的细胞渗透到材料内部.体内培养2周后,大量细胞占据材料的边缘,有部分细胞能渗透到材料内部甚至材料全层.体内培养4周后,大量细胞渗透支架全层.HLA-I抗体检测发现,支架材料内部细胞阳性表达,说明胶原支架内部的细胞来源于hADSCs.结论 胶原支架与hADSCs具有较好的相容性,可作为hADSCs的载体材料,用于组织工程缺损修复的研究.