缺血再灌注损伤对大鼠肝细胞周期G2/M期相关基因Gadd45a和Egr-1表达的影响

• 作者: 张劭 张静
• 来源期刊: 中华器官移植杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大鼠 肝 缺血再灌注 基因,cdc
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 466-469
• 分类号: R657.3
• 字数: 3432字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1785.2012.08.006

摘要

目的 观察缺血再灌注损伤(IRI)对大鼠肝组织内细胞周期调控相关基因转录和表达的影响,探讨生长阻滞和DNA损伤修复基因(Gadd45a)和早期生长反应基因1(Egr-1)参与DNA损伤后修复的可能机制.方法 按随机成组对照设计将大鼠平均分为正常对照组、缺血组、再灌注30min、1h、2h、3h及24 h组,于相应时间点获取大鼠肝组织样本,将利用芯片实验筛选出的关键基因Gadd45a和Egr-1作为目的基因,并采用RNA印迹法和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT1PCR)验证基因芯片筛查的结果,采用荧光免疫组织化学染色检测冰冻新鲜肝组织样本Egr-1的表达,采用免疫组织化学染色检测肝组织样本Gadd45a的表达.结果 RNA印迹检测结果显示,RT-PCR产物与待测的目标基因一致；表达谱芯片信号与RT-PCR的检测显示,目的基因的表达变化特征均为再灌注早期(1h)升高4倍以上,其中Egr-1的表达上调9.39倍,Gadd45a的表达上调8.28倍及热休克蛋白70-1a的表达上调10.8倍；再灌注后24 h均降至正常水平,芯片初筛结果与RT-PCR的检测结果一致,是准确、可靠的.荧光免疫组织化学检测显示,再灌注1h组和2h组肝组织细胞核Egr-1的表达均为阳性；免疫组织化学检测显示,随着再灌注时间的增加,细胞核和细胞浆内Gadd45的表达逐渐升高.结论 Gadd45a和Egr-1基因均是核因子kB调控通路的关键基因,在大鼠肝脏IRI中参与调控了细胞周期G2/M期的停滞和修复受损的DNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张静		36	122	6.0	9.0
2	张劭		12	29	4.0	5.0