人超氧化物歧化酶-过氧化氢酶融合基因的构建、表达及其产物的初步纯化和性质研究

• 作者: 刘树滔 吕元辉 李仁宽 盛明明 程曦 缪少锋 饶平凡
• 来源期刊: 福州大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 超氧化物歧化酶 过氧化氢酶 融合蛋白 抗H2O2能力
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 页码范围: 119-125,131
• 页数: 8页
• 分类号: Q7
• 语种: 中文
• DOI: 35-1117/N.20120112.1144.022

摘要

尝试应用基因工程技术制备一种兼具人超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的双功能融合蛋白CAT-PTD-SOD,其中的PTD是序列为RKKRRQRRR的短肽.首先通过重叠PCR构筑CAT-PTD-SOD融合基因,然后把该基因转化进入大肠杆菌表达菌株Rosetta 2(DE3)菌株.通过SDS-PAGE、CAT和SOD活性分析以及分离纯化组分的分析确认该重组菌株能够表达CAT-PTD-SOD,其表达量可达总蛋白的8.9％,SDS-PAGE显示其分子量约为85 kD.可溶性实验发现该融合蛋白大部分以兼具SOD和CAT活性的可溶形式存在.抗H2O2能力实验表明CAT-PTD-SOD具有很好的抗H2O2能力,在0.033 mol·L-1、甚至0.067 mol·L-1的H2O2溶液中,其SOD活性20 min内无明显下降.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	饶平凡		181	1617	19.0	28.0
2	刘树滔		86	519	12.0	18.0
3	李仁宽		21	41	4.0	5.0
4	程曦		4	0	0.0	0.0
5	吕元辉		2	0	0.0	0.0
6	缪少锋		2	0	0.0	0.0
7	盛明明		1	0	0.0	0.0