小干扰RNA抑制L2RYC细胞MDR1表达及逆转对长春新碱的耐药性

• 作者: 何昀 刘东尧 华燚 李明勇 温晟 王强 魏光辉
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 多药耐药基因 卵黄囊瘤 化疗 长春新碱
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1009-1014
• 页数: 6页
• 分类号: R737
• 字数: 3091字
• 语种: 中文

摘要

目的 研究携带多药耐药基因(MDR1)小干扰RNA(siMDR1)的真核表达质粒对L2RYC卵黄囊瘤细胞株中MDR1基因及蛋白表达的抑制效果,并观察siMDR1作用前后细胞对长春新碱(VCR)耐药性的变化.方法 设计4对特异性针对大鼠MDR1的siRNA序列,分别与pSES-HUS质粒重组获得pSES-siMDR1真核表达质粒,通过脂质体转染到L2RYC细胞中,用实时荧光定量PCR及Western blot检测转染后MDR1的mRNA及蛋白表达.转染后的细胞中再加入不同浓度的VCR,用MTT法检测吸光度,并计算出各组半数抑制浓度(IC50)值.结果 4对siMDR1分别转染均能不同程度地抑制L2RYC细胞MDR1基因表达,pool组MDR1的相对表达量最低(0.396±0.080)；MDR1蛋白表达也能被有效抑制；经不同siMDR1转染的细胞加入VCR后细胞增殖被抑制,ICso降低,pool组最显著为(1.632±0.423)mg/L,与其余各组比较有明显差异(P＜0.05).结论 pSES-siMDR1真核表达质粒能有效抑制MDR1基因和蛋白的表达,MDR1表达被抑制后L2RYC细胞对VCR的敏感性增加.