免疫磁性微球富集检测结核分枝杆菌方法的建立

• 作者: 卫蓓文 古丽仙·吐尔逊 周敏 张海晨 樊绮诗 费凤英 陈长强 顾志冬
• 来源期刊: 诊断学理论与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 免疫磁性微球 磁性分离富集 涂片镜检 培养
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 476-480
• 页数: 5页
• 分类号: R521
• 字数: 4207字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-2870.2012.05.010

摘要

目的:建立一种基于免疫磁性微球富集的检测结核分枝杆菌的新方法,以提高其临床阳性检出率.方法:提取结核分枝杆菌H37Rv抗原,并免疫新西兰白兔,制备兔抗结核分枝杆菌H37Rv血清.分离纯化抗血清,采用酶联免疫吸附试验和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术鉴定抗体的效价和纯度.将抗结核分枝杆菌抗体与生物素标记,并与结合有链霉亲和素的磁性微球进行连接获得免疫磁性微球,优化反应条件,建立免疫磁性微球富集检测结核分枝杆菌的方法.以培养结果作为判断金标准,比较免疫磁性微球富集方法与常规涂片镜检方法的检出率.结果:制备的抗结核分枝杆菌抗体浓度为14 mg/mL.最终效价为1:20 000.检测158例临床标本,免疫磁性微球富集方法可使涂片镜检阳性率从5.1％提高到13.9％.22例免疫磁性微球富集后涂片镜检阳性的标本培养均为阳性,其特异度为100％.结论:建立的免疫磁性微球富集方法简便、有效,能显著提高结核分枝杆菌镜检的灵敏度和特异度.