EID3基因在大肠癌传代细胞mRNA的表达及其克隆

• 作者: 张雪梅 徐娜 李志 牟红梅 王钦富 韩慧
• 来源期刊: 中国癌症防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大肠癌 EID3 克隆 mRNA
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 38-42
• 分类号: R734.3+8
• 字数: 4216字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5671.2012.01.09

摘要

目的 研究新的大肠癌相关性抗原EID3基因的克隆及其诊断价值.方法 用SEREX技术筛选睾丸组织cDNA噬菌体表达文库,发现了一类似于肿瘤抑制基因(E1A基因)的EID3基因(NM-001008394.1),构建原核表达载体pET32k-EID3,IPTG诱导重组EID3蛋白质的表达,并利用Ni NTA His Bind树脂纯化该重组蛋白质.用RT-PCR技术研究EID3 mRNA在正常组织和大肠癌传代细胞的表达.结果 经PCR扩增成功获得1 002 bp的人EID3基因,测序正确.在大肠杆菌中目的 蛋白质的表达量占菌体总蛋白质的10%,SDS-PAGE及Western blot分析显示,其相对分子质量为39 000 KD,纯化后的6xHis EID3纯度可达92%.通过RT-PCR分析发现,EID3基因在43例大肠癌传代细胞株中有39例阳性,阳性率为90.7%.在正常组织中,除睾丸组织不表达或有极低水平转录外,余均不表达.结论 EID3基因克隆、表达及纯化的成功,为其今后的肿瘤诊断和肿瘤多肽疫苗治疗研究奠定了基础.EID3 mRNA表达检测用于诊断大肠癌,可能具有高特异性和高敏感性的特点.EID3蛋白在大肠癌患者中能够诱导机体的抗体免疫应答,可能成为一个新的大肠癌相关性抗原分子,其用于诊断大肠癌的可行性,有待进一步深入研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	牟红梅	大连大学免疫学研究所	7	78	5.0	7.0
2	王钦富	大连大学免疫学研究所	23	177	6.0	13.0
3	张雪梅	大连大学免疫学研究所	5	3	1.0	1.0
4	李志	大连中心医院检验科	1	0	0.0	0.0
5	徐娜	大连大学免疫学研究所	3	4	1.0	2.0
6	韩慧	大连大学免疫学研究所	10	78	4.0	8.0