膜联蛋白A2在糖基化终末产物诱导的内皮细胞骨架重构及迁移中的作用

• 作者: 杨侠 毕超 董晓光
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 膜联蛋白A2 糖基化终末产物 细胞骨架 迁移 磷酸化
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 322-326
• 页数: 5页
• 字数: 5273字
• 语种: 中文

摘要

目的 观察膜联蛋白A2( annexin A2,ANXA2)对糖基化终末产物牛血清白蛋白(advanced glycation bovine serum albumin,AGE-BSA)培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)骨架重塑、细胞迁移能力的影响,探讨ANXA2在糖尿病视网膜新生血管病变中的作用,为视网膜新生血管性疾病的防治寻找有效的分子靶点提供理论依据.方法 用含AGE-BSA(0.2 g·L-1)的高糖型DMEM培养液培养HUVEC,并用ANXA2siRNA干扰AGE-BSA培养的HUVEC中ANXA2的表达；免疫沉淀及Western blot检测各组中ANXA2蛋白的表达；FITC-鬼笔环肽染色观察ANXA2对HUVEC骨架重塑的影响；划痕法观察ANXA2对HUVEC迁移能力的影响.结果 空白对照组、阴性干扰组、阳性干扰组ANXA2蛋白的表达量分别为1.17±0.03、1.18±0.04、0.68±0.05,阳性干扰组与空白对照组之间差异有显著统计学意义(F=152.76,P=0.000)；空白对照组、BSA组、AGE-BSA组、阴性干扰组、阳性干扰组处理24h后骨架染色显示:AGE-BSA组同空白对照组相比,细胞骨架应力纤维排布改变,而阳性干扰组同空白对照组骨架排布相仿；空白对照组、BSA组、AGE-BSA组、阴性干扰组、阳性干扰组处理24h 后迁移入划痕的细胞数分别为153±12、143±16、192±8、176±6、142±14,AGE-BSA组与空白对照组之间、阳性干扰组与AGE -BSA组之间差异均有统计学意义(均为P＜0.05)；空白对照组、BSA组、AGE-BSA组处理24 h后磷酸化ANXA2蛋白的表达量分别为0.94±0.57、0.94±0.32、1.12±0.95,AGE-BSA组与空白对照组之间差异有统计学意义(F =6.899,P＜0.05).结论 ANXA2参与AGE-BSA诱导的HUVEC细胞骨架重塑及细胞迁移能力改变,并且极可能通过其酪氨酸磷酸化形式来发挥中介作用,针对ANXA2生物学特性的深入研究可能为糖尿病视网膜病变的预防治疗提供新的思路及方法.