下调EMS1/cortactin对人高转移潜能肝癌细胞株迁移和内吞的影响

• 作者: 叶蕴瑶 吴圆圆 周家名 孙树刚 王桂兰 陈莉
• 来源期刊: 临床与实验病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: MHCC-97H细胞 EMS1/cortactin 核酸干扰 迁移 内吞
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1235-1238,1242
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3632字
• 语种: 中文

摘要

目的 观察下调人高转移潜能肝癌细胞株(MHCC-97H)中EMS1/cortactin对细胞迁移和内吞的影响,探讨EMS1/cortactin在细胞内可能存在的功能.方法 构建靶向EMS1的shRNA真核表达质粒(EMS1-PSilencer4.1-GFP-shRNA,EMS1-shRNA);通过Lipofectamine 2000处理后将EMS1-shRNA转染MHCC-97H细胞,免疫荧光显微镜下观察转染效率;采用RT-qPCR和Westen blot分别检测EMS1 mRNA和cortactin蛋白表达水平;利用划痕、Transwell小室实验、转铁蛋白(transferrin,Tfn)内吞实验分别研究细胞迁移和内吞作用.结果 成功构建EMS1-shRNA.免疫荧光显微镜下见转染细胞中明显的绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP),荧光强度在48 h达到峰值,其转染效率达84.76%.与未处理组相比,转染EMS1-shRNA细胞中EMS1 mRNA水平下降至19.00%,cortactin蛋白水平下降至36.74%、细胞相对迁移距离下降至55.52%、相对穿膜细胞数下降至27.79%、细胞内吞荧光标记Tfn水平显著减弱(P均<0.05).结论 下调EMS1/cortactin后,MHCC-97H细胞迁移、内吞能力明显下降,提示EMS1/cortactin与原发性肝癌(primary human heptatocellular,HCC)转移的生物学行为有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈莉	南通大学医学院病理系	161	548	10.0	16.0
2	王桂兰	南通大学医学院病理系	34	114	5.0	8.0
3	吴圆圆	南通大学医学院病理系	22	41	4.0	5.0
4	周家名	南通大学医学院病理系	6	14	2.0	3.0
8	叶蕴瑶	南通大学医学院病理系	6	9	2.0	3.0
9	孙树刚		2	4	1.0	2.0