应用流式细胞术检测人牙髓细胞内活性氧的方法探讨

• 作者: 伍甜甜 朱亚琴 李莉芬 杜嵘
• 来源期刊: 上海口腔医学
• 学科: 医学
• 关键词: 流式细胞术 人牙髓细胞 活性氧
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 617-621
• 分类号: R781.05
• 语种: 中文

摘要

目的:建立用流式细胞术检测人牙髓细胞内活性氧变化的方法.方法:采用改良组织块法培养人牙髓细胞,牙髓细胞经不同浓度H2O2处理30 min后,以终浓度分别为10、20 μmol/L的2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(2’,7’-dichlorofluoresin diacetate,DCFH-DA)作为荧光探针,与牙髓细胞共同避光孵育20 min,使用流式细胞仪检测细胞内氧化性二氯荧光素(Dichlorofluorescein,DCF)的荧光强度.采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:不同浓度探针装载率不同；不同浓度H2O2作用于细胞一定时间后,使用流式细胞术可检测到细胞内活性氧水平产生相应变化,且多次重复结果稳定.结论:选用终浓度为20 μmol/L的DCFH-DA作为探针装载率较高,利用流式细胞仪检测人牙髓细胞内活性氧的产生是一种可靠、稳定、简便的方法.