犬成肌细胞体外向纤维软骨细胞表型分化的实验研究

• 作者: 卢亮宇 朱文辉 李靖龙 王予彬 程晏 顾羊林
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 成肌细胞 软骨分化 种子细胞 人源性软骨源性形态发生蛋白-2 软骨组织工程
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-6
• 分类号: R684
• 字数: 3652字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn1008-0392.2012.02.001

摘要

目的 观察体外培养的犬成肌细胞在诱导培养液作用下向纤维软骨细胞表型分化的可行性.方法 取成年比格犬大腿后群肌肉,以机械分解法与二步酶消化法相结合,分离获取成肌细胞,取第4代成肌细胞,实验组以2.0×104/cm2细胞密度接种于24孔板,在含有人源性软骨源性形态发生蛋白-2(human cartilage-derived morphogenic protein-2,hCDMP-2)的高糖DMEM完全培养液中诱导分化,对照组以相同细胞密度接种于24孔板,加入不含诱导因子的高糖DMEM完全培养液.诱导21 d后,倒置显微镜下观察诱导细胞形态学的改变,H-E染色、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原蛋白免疫组织化学方法检测诱导细胞的分泌功能,RT-PCR检测Ⅰ型、Ⅱ型胶原蛋白和Sox9的mRNA表达情况.结果 诱导后成肌细胞的形态由长梭形向多角形类、圆形转变.甲苯胺蓝染色呈明显异染,Ⅱ型胶原蛋白免疫细胞化学检测阳性,对照组阴性.RT-PCR检测显示经诱导后细胞Ⅰ型、Ⅱ型胶原蛋白和Sox9的mRNA在对应区域均有目的条带出现,而对照组未见明显的目的条带亮带.结论 在hCDMP-2诱导下,犬成肌细胞可定向分化为软骨细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王予彬	同济大学附属东方医院运动创伤关节外科	38	437	11.0	19.0
2	朱文辉	同济大学附属东方医院运动创伤关节外科	13	115	6.0	10.0
3	顾羊林	同济大学附属东方医院运动创伤关节外科	2	3	1.0	1.0
4	卢亮宇	同济大学附属东方医院运动创伤关节外科	12	131	7.0	11.0
5	程晏	同济大学附属东方医院运动创伤关节外科	2	8	1.0	2.0
6	李靖龙	同济大学附属东方医院运动创伤关节外科	3	24	2.0	3.0