C57BL/6和A/J两品系小鼠脾脏消减cDNA文库的构建及差异基因分析

• 作者: 刘琳 殷复建 沈学怀 范红结 谢正露 马海田
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: C57BL/6小鼠 A/J小鼠 抑制性消减杂交 差异表达基因 消减cDNA文库
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 兽医
• 页码范围: 1406-1417
• 分类号: S813.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.07.020

摘要

[目的]检测健康C57BL/6和A/J小鼠常规免疫指标,构建脾脏消减cDNA文库并筛选差异表达基因,以探讨两品系小鼠对猪链球菌抗病性差异的分子机制.[方法]利用ELISA法检测血清常规免疫指标,抑制性消减杂交(suppression subtraction hybridization,SSH)技术构建8周龄小鼠脾脏差异表达基因的cDNA文库.[结果]试验结果表明,A/J品系小鼠血清中IgA水平明显高于C57BL/6品系小鼠(P＜0.05),而血清IgG和IFN水平在两品系小鼠间均无显著差异.对筛选的149个阳性克隆进行测序,去除冗余的cDNA序列载体并聚类拼接后获得56条差异表达序列标签(ESTs).利用Genebank的BLAST分析核酸和蛋白质同源性比较,26个不同的基因或ESTs具有高度的同源性,2条ESTs未找到同源序列.[结论]筛选到很多EST与信号转导、细胞凋亡及免疫等重要功能基因高度同源,为研究猪链球菌的致病机理和防治提供了实验依据.