肝细胞生长因子的表达、纯化和基本活性研究

• 作者: 吕建新 岑东 沈蓉蓉 滑世轩 罗建平 裴仁治 赵行 郑筱娇 高洲
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 肝细胞生长因子 蛋白 重组 纯化 活性
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 967-971
• 页数: 5页
• 字数: 5297字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2012.11.011

摘要

目的 通过构建肝细胞生长因子(HGF)基因的重组原核表达载体,转化大肠杆菌,制备HGF重组蛋白并初步证实其活性.方法 克隆HGF基因插入载体pET-26b(+),构建重组原核表达载体pET-26b(+)-HGF,转化E.coli Rosseta(DE3).IPTG诱导转化菌表达重组蛋白,采用Ni-NTA树脂亲和层析法进行纯化,复性后冷冻干燥.结果 HGF基因重组原核表达载体pET-26b(+)-HGF构建成功.转化pET-26b(+)-HGF的E.coli Rosseta(DE3)以包涵体形式大量表达目的蛋白,占菌体总蛋白的38％,并经Western blot证实.经Ni-NTA树脂亲和层析法纯化后HGF蛋白纯度约为95％,作用于人非小细胞肺癌细胞系A549细胞发现可促进其增殖、迁徙并抑制凋亡.结论 成功构建了HGF基因重组原核表达载体pET-26b(+)-HGF,转化E.coli Rosseta(DE3)后成功表达,纯化复性回复重组HGF蛋白结构,经体外实验证实具有生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕建新	温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室	153	1535	21.0	32.0
2	裴仁治		23	62	5.0	6.0
3	岑东	温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室	12	23	3.0	4.0
5	罗建平		8	37	3.0	6.0
6	郑筱娇	温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室	1	1	1.0	1.0
7	高洲	温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室	1	1	1.0	1.0
8	沈蓉蓉	温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室	2	4	1.0	2.0
9	赵行	温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室	4	13	3.0	3.0