黄瓜细菌性白枯病菌ELISA检测方法的建立

• 作者: 刘长远 孙艳秋 曹远银 赵奎华
• 来源期刊: 沈阳农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄瓜细菌性白枯病菌 抗体 酶联免疫吸附分析
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 528-533
• 页数: 6页
• 分类号: S436.421.1.9
• 字数: 4056字
• 语种: 中文

摘要

以黄瓜细菌性白枯病菌胞内蛋白为免疫原,制备抗体,建立黄瓜细菌性白枯病菌ELISA检测方法.结果表明:测定纯化后抗体的效价为1∶4000,与黄瓜细菌性角斑病菌等26个菌株无交叉反应,特异性强；方阵试验测定抗原的最佳包被浓度为107cfu· mL-1,抗体的工作浓度为1∶2000;优化ELISA检测条件,确定抗体4℃过夜包被效果最好,选择5％的胎牛血清作为抗体的封闭液,抗体的最佳封闭时间为1.5h,抗体的最佳孵育时间为1.5h,最佳底物作用时间为10min；建立ELISA标准工作曲线,表明抗体的灵敏度为105cfu·mL-1.ELISA检测田间采集的白枯病病叶显示,抗体可与病叶提取液发生特异性反应,而与健康叶提取液呈阴性反应,由此可确定白枯病菌的存在与否.本方法可用于田间黄瓜细菌性白枯病快速检测,以及时指导病害防治.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹远银	沈阳农业大学植物保护学院	109	928	17.0	23.0
2	赵奎华	辽宁省农业科学院植物保护研究所	77	783	16.0	23.0
3	刘长远	辽宁省农业科学院植物保护研究所	108	945	16.0	23.0
4	孙艳秋	沈阳农业大学植物保护学院	25	160	7.0	12.0