阿霉素肾病大鼠凋亡相关基因FADD和APAF1启动子DNA甲基化的变化

• 作者: 仲芳 刘剑 卢颖 周桥 徐丽梨 王伟铭 郝旭 陈楠
• 来源期刊: 上海交通大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 凋亡 DNA甲基化 高分辨率熔解曲线 肾脏
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1455-1460
• 页数: 6页
• 分类号: R692
• 字数: 4198字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8115.2012.11.013

摘要

目的 探讨阿霉素肾病大鼠肾脏组织中凋亡相关基因DNA甲基化的变化与疾病进展的关系.方法 12只SD雄性大鼠随机分为阿霉素肾病组和正常对照组,每组6只.阿霉素肾病组大鼠分别于首次和1周后阴茎静脉注射5 mg/kg和2.5 mg/kg阿霉素造模.于造模后8周经腹主动脉采血,处死大鼠并留取肾脏组织.对两组大鼠血肌酐(Crea)、血尿素氮(BUN)、血清白蛋白(ALB)及尿白蛋白/肌酐比值(UACR)等生化指标进行检测和比较；Masson染色观察肾脏组织病理学改变；TUNEL染色观察大鼠肾小管和肾小球细胞凋亡情况；采用Real-Time PCR技术经高分辨率熔解曲线(HRM)分析法对两组大鼠肾皮质Fas相关死亡区(FADD)和凋亡蛋白酶活化因子1(APAF1)启动子DNA甲基化进行检测,Real-Time PCR检测FADD mRNA表达.结果 与正常对照组比较,阿霉素肾病组大鼠Crea、BUN和UACR显著升高(P＜0.05或P＜0.01),ALB明显降低(P＜0.01).病理组织学检查发现:阿霉素肾病组大鼠肾小球系膜细胞增生明显,毛细血管受压,球囊粘连；肾小管上皮细胞肿胀,间质增生、炎症细胞浸润.TUNEL染色细胞凋亡检测发现,与正常对照组比较,阿霉素肾病组大鼠肾小管和肾小球凋亡细胞数量明显增加(P＜0.01).HRM分析法和Real-Time PCR检测结果显示:与正常对照组比较,阿霉素肾病组FADD启动子DNA呈较高程度的 甲基化,FADD mRNA表达明显上调(P＜0.05).结论 在阿霉素肾病大鼠中,FADD基因启动子检测序列DNA甲基化程度增高,但其可能并非为影响FADD mRNA表达的主要因素.