Bcl-2基因转染对体外培养大鼠大脑皮层神经细胞氧糖剥夺损伤的保护作用

• 作者: 容琼文 张忠胜 梅元武 苏庆杰
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: bcl-2 神经细胞 基因转染 氧糖剥夺 神经保护
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 400-403,408
• 分类号: R743
• 字数: 3951字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2012.04.004

摘要

目的 研究bcl-2基因转染对体外培养大鼠大脑皮层神经细胞氧糖剥夺损伤的保护作用,为基因转染治疗脑血管病寻找实验依据.方法 体外培养新生大鼠大脑皮层神经细胞,应用脂质体转染法将bcl-2基因转染入神经细胞,建立氧糖剥夺模型,实验分为正常对照组、氧糖剥夺组和bcl-2转染组(转染bcl-2基因24 h后,进行氧糖剥夺),采用Western blot法、MTT法、流式细胞仪分别检测各组细胞的bcl-2蛋白表达、细胞活力及凋亡率.结果 SD大鼠大脑皮层神经细胞可纯化体外培养,纯度达到90%以上.成功建立了大鼠神经细胞体外氧糖剥夺模型,成功进行了质粒pc-DNA3.1-hbcl-2的转化、扩增及基因转染.对照组神经细胞bcl-2少量表达,氧糖剥夺组bcl-2蛋白微弱表达,转染组细胞bcl-2蛋白高表达,各组间差异均有统计学意义(均P＜0.01).MTT法检测结果显示,对照组细胞的吸光度值(A)为(0.851±0.034);氧糖剥夺组的A值为(0.648±0.030),与对照组相比明显降低(P＜0.01);转染组的A值为(0.787±0.004),低于对照组(P＜0.05),但明显高于氧糖剥夺组(P＜0.05).对照组神经细胞凋亡率为4.6%;氧糖剥夺损伤后细胞凋亡率明显增加,为19.6%;转染组细胞凋亡率与氧糖剥夺组相比有明显下降,为9.6%,差异有统计学意义(均P＜0.01).结论 脂质体介导的bcl-2基因转染对氧糖剥夺损伤的大鼠大脑皮层神经细胞有明显保护作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梅元武	华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科	192	1290	17.0	23.0
2	张忠胜	华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科	2	2	1.0	1.0
3	苏庆杰	海南医学院附属医院神经内科	57	193	8.0	11.0
4	容琼文	海南医学院附属医院神经内科	22	63	4.0	7.0