慢病毒载体介导的结缔组织生长因子基因沉默对下游基因的影响

• 作者: 张岩 张野 彭梅娟 白雪帆 谢玉梅 郝春秋
• 来源期刊: 实用肝脏病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HSC-T6细胞 结缔组织生长因子 慢病毒载体 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 212-215
• 分类号: R575.2
• 字数: 3319字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5069.2012.03.013

摘要

目的 利用RNA干扰技术,以慢病毒为载体,介导结缔组织生长因子(CTGF)基因沉默,并观察其对下游基因表达的影响.方法 用构建的CTGF小干扰RNA(siRNA)慢病毒转移质粒与包装质粒、包膜蛋白质粒共转染293T细胞,包装成介导CTGF基因沉默的慢病毒载体;感染肝星状细胞系HSC-T6,应用Real-time PCR和Western免疫印迹法筛选基因沉默效率最高的慢病毒载体;再根据绿色荧光蛋白(GFP)表达水平检测感染效率;应用Real-time PCR法检测CTGF基因沉默后HSC-T6中金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)、TIMP-2和Ⅰ型胶原mRNA表达水平.结果 包装的慢病毒载体感染HSC-T6细胞的效率高于50%;感染HSC-T6细胞后,CTGF的表达在mRNA和蛋白水平均受到明显抑制,其中TS1具有最佳的抑制效率;HSC-T6细胞CTGF基因沉默后,其TIMP-1、TIMP-2和Ⅰ型胶原mRNA水平也显著降低.结论 包装的慢病毒载体在HSC-T6中具有较好的感染效率和CTGF基因沉默效果,基因沉默后可进一步抑制HSC-T6细胞TIMP-1、TIMP-2和Ⅰ型胶原的基因表达,这在抗纤维化的研究中具有积极的意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭梅娟	西安市第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	3	3	1.0	1.0
2	郝春秋	西安市第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	3	3	1.0	1.0
3	张野	西安市第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	2	3	1.0	1.0
4	谢玉梅	西安市第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	3	3	1.0	1.0
5	张岩	西安市第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	2	3	1.0	1.0
6	白雪帆	西安市第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	4	11	2.0	3.0