FQ-PCR同步检测HTLV-Ⅰ及HTLV-Ⅱ方法的建立及临床应用

• 作者: 周立 唐景峰 张长明 汪晓莉 王业富 程鹏飞 陈琦
• 来源期刊: 武汉大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人嗜T淋巴细胞病毒 人嗜T淋巴细胞病素-Ⅰ型相关性脊髓病 热带痉挛性截瘫 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法研究
• 页码范围: 667-672
• 分类号: R373
• 语种: 中文

摘要

目的:建立可同时检测HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ的双重荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,并对所建体系进行方法学评价.方法:根据HTLV-Ⅰ pol基因和HTLV-Ⅱtax基因的保守序列设计引物及TaqMan-LNA探针,构建重组质粒作为荧光定量PCR的标准品.优化荧光定量PCR反应条件,建立起可同时检测HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ的双重荧光定量PCR (FQ-PCR)的方法.结果:结果显示该方法对HTLV-Ⅰ及HTLV-Ⅱ的线性范围分别为108-102 copy/μl和107-10 copy/μl;检测灵敏度分别为102copy/μl和10 copy/μl.对阳性标本检测均呈阳性,对非目标菌检测均呈阴性.应用该方法对175例临床标本进行考核,有HTLV-Ⅰ阳性6例,HTLV-Ⅱ阳性3例,其中HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ双阳性2例.结论:本研究建立的双重FQ-PCR方法特异、快速、灵敏,对HTLV的血液筛查有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王业富	武汉大学生命科学院	23	94	6.0	8.0
2	周立	武汉大学生命科学院	18	173	8.0	13.0
3	程鹏飞		16	115	7.0	10.0
4	唐景峰	武汉大学生命科学院	6	15	2.0	3.0
5	陈琦	武汉科技大学附属天佑医院检验科	10	29	3.0	5.0
6	张长明		1	0	0.0	0.0
7	汪晓莉		1	0	0.0	0.0