AKT抑制剂对鼻咽癌细胞株CNE1的放疗增敏作用

• 作者: 刘志刚 卢泰祥 吴晓琪 李丹 王汉渝 韩非
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻咽肿瘤 AKT抑制剂 放射增敏 自噬 凋亡
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 387-393
• 分类号: R739.63
• 字数: 4997字
• 语种: 中文

摘要

[目的]探讨Akt抑制剂124005对人鼻咽癌细胞CNE1放射增敏效应及其潜在机制.[方法]CCK8法检测不同浓度124005对人鼻咽癌CNE1细胞的抑制作用,计算IC50值,选择低于IC50的药物浓度作为增敏浓度.集落形成实验检测放射线加或不加124005以及124005+放射线组联合或不联合自噬抑制剂3-MA对CNE1细胞生存曲线的影响.间接免疫荧光法检测y-H2AX观察DNA损伤修复和GFP-LC3转染CNE1中自噬标志物LC3的聚集.流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡.免疫印迹法(Weste m blot)检测Caspase-3、PARP、Beclin 1和LC3-Ⅱ的表达,并检测AKT及下游信号通路的表达,探索Akt抑制剂124005放射增敏效应及其潜在机制.[结果]124005对CNE1 IC50值为30.5μμmol/L.集落形成实验显示,DEF值放疗+8μmol/L124005持续用药组为1.92,放疗+12.5μmol/L124005用药72h组为1.12,共聚焦显微镜观察显示124005联合放疔显著增加了CNE1细胞照射后细胞核内y-H2AX焦点的聚集和转染GFP-LC3质粒的CNE1细胞内LC3的点状聚集.流式检测124005可以明显提高放射线诱导的CNE1细胞凋亡,凋亡率最高达52.9％.Western blot显示124005可以显著抑制放射后p-AKT及下游p-GSK-31β和p-PRAS40的表达,增加放射引起的cleaved caspase-3和cleaved PARP以及Beclin1和 LC3-Ⅱ的表达.应用3-MA可降低124005处理后LC3-Ⅱ的表达水平.放射+124005再联用3mmol/L3-MA组的DEF值为1.69,明显低于单纯放射+124005组(DEF=1.97).[结论]124005通过对AKT以及下游通路的抑制,抑制DNA损伤修复,同时增加凋亡和自噬来起到对CNE1细胞株放射增敏的效应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李丹	中山大学肿瘤防治中心放疗科	75	454	11.0	20.0
2	韩非	中山大学肿瘤防治中心放疗科	19	326	9.0	18.0
3	卢泰祥	中山大学肿瘤防治中心放疗科	46	734	15.0	26.0
4	刘志刚	中山大学肿瘤防治中心放疗科	11	68	4.0	8.0
5	吴晓琪	中山大学肿瘤防治中心放疗科	2	0	0.0	0.0
6	王汉渝	中山大学肿瘤防治中心放疗科	5	10	2.0	3.0