高糖诱导人脐静脉内皮细胞中玻连蛋白的表达和细胞骨架重塑

• 作者: 杨侠 王玉风 董晓光
• 来源期刊: 眼科新进展
• 关键词: 高糖 人脐静脉内皮细胞 玻连蛋白 细胞骨架 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 512-516
• 页数: 5页
• 字数: 5587字
• 语种: 中文

摘要

目的 观察高糖培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)中玻连蛋白(vitronectin,VN)表达的变化、细胞微丝骨架的改变以及细胞迁移能力、成管能力的变化.方法 建立高糖培养的HUVEC体外模型,并常规培养HUVEC作为正常对照,Western blot方法检测VN蛋白的表达,免疫荧光细胞化学法观察HUVEC中微丝骨架F-actin的变化,划痕法检测HUVEC迁移能力的改变,Matrigel法检测HUVEC的成管能力.结果 培养24h时,正常组和高糖组中VN蛋白表达量分别为0.893±0.119、1.295±0.080,48 h时分别为0.874±0.115、1.724±0.098,差异均有统计学意义(t=-4.857、-9.710,均为P＜0.05).免疫荧光细胞化学结果显示培养24h、48 h时高糖组中都伴有更加明显的细胞微丝骨架结构改变,划痕法检测培养24 h时正常纽和高糖组中迁移到划痕内的细胞数分别为( 198.000±15.880)个、(242.000±11.130)个,48 h时分别为( 293.000±8.681)个、(334.000±10.863)个,差异均有统计学意义(t=-5.495、-7.193,均为P＜0.05).Matrigel法发现培养6h时高糖组中形成的闭合管腔数目(120.000±9.813)个多于正常组(91.000±9.867)个,12 h时形成的闭合管腔数目( 19.000±3.209)个也多于正常组(8.000±3.011)个,差异均有统计学意义(t=-5.163、-5.659,均为P＜0.05).结论 VN可能在糖尿病视网膜病变中起一定作用,且VN功能的发挥可能涉及到细胞骨架重塑,但需要进一步干扰VN的表达以证实其作用.