生长激素促分泌物受体的内源性配体ghrelin促进大鼠心肌微血管内皮细胞体外血管生成

• 作者: 李桂琼 柯大智 王丽 陈庆伟
• 来源期刊: 中华心血管病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 新生血管化,生理性 Ghrelin
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 50-56
• 分类号: R714.252
• 字数: 6608字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3758.2012.01.011

摘要

目的 探讨生长激素促分泌物受体的内源性配体 ghrelin 对大鼠心肌微血管内皮细胞增殖、迁移和体外血管生成的影响,并探讨其潜在的信号转导途径.方法 (1)植块法分离成年SD 雄性大鼠的心肌微血管内皮细胞,Ⅷ因子免疫组织化学鉴定细胞种类并传代培养.(2)通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹法(Western blot)鉴定ghrelin及其天然受体(growth hormone secretagogue-receptor,GHS-R)在心肌微血管内皮细胞上mRNA 及蛋白的表达.(3)用不同浓度(10-9～10-7mol/L)的ghrelin干预心肌微血管内皮细胞后,检测心肌微血管内皮细胞的增殖、迁移及体外血管生成的变化.(4)用不同浓度(10-9～10-7 mol/L)的ghrelin 干预心肌微血管内皮细胞后,观察ERK2磷酸化表达.用MAPK/ERK2的特异性抑制剂PD98059提前干预细胞后,观察ghrelin对大鼠心肌微血管内皮细胞体外血管生成及ERK2磷酸化表达的变化.结果 (1)植块法培养的原代心肌微血管肉皮细胞纯度达95％左右,且具有形成管腔样结构的能力.(2)RT-PCR、免疫荧光、ELISA和Western blot检测发现ghrelin及GHS-R在心肌微血管内皮细胞上均有表达.(3)分别用10-9～10-7 mol/L的ghrelin干预心肌微血管内皮细胞后,发现10-8、10-7 mol/L ghrelin处理组心肌微血管内皮细胞的增殖明显高于正常对照组[分别为(12.37±0.70)和(12.73±0.78)pmol/L比(7.40±0.71)pmol/L,P值均为0.001],迁移亦明显高于正常对照组(分别为127.00±4.06和121.00±4.30比113.80±4.60,p值分别为0.001和0.03),体外的血管生成亦明显高于正常对照组[分别为(72.20±5.72)和(71.00±7.78)mm比(28.60±5.13)mm,P均＜0.001].(4)10-8、10-7mol/L ghrelin处理组ERK2的磷酸化表达水平明显高于正常对照组(分别为0.92±0.13和1.15 ±0.16比0.29±0.04,P均＜0.001).若提前用PD98059干预细胞,则能明显抑制ghrelin诱导的体外血管生成及ERK2的磷酸化表达.结论 ghrelin及其受体GHS-R在大鼠心肌微血管内皮细胞上均有表达,ghrelin可通过激活ERK2的磷酸化促进心肌微血管内皮细胞的体外血管生成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈庆伟	重庆医科大学附属第二医院老年心血管科	95	910	16.0	26.0
2	王丽	重庆医科大学附属第二医院老年心血管科	36	196	8.0	11.0
3	李桂琼	重庆医科大学附属第二医院老年心血管科	35	305	9.0	16.0
4	柯大智	重庆医科大学附属第二医院老年心血管科	41	460	9.0	20.0