TLR4基因沉默下调TLR2信号通路在RAW264.7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用

• 作者: 朱根华 罗闳丹 苏明声 谢卫华 谢小梅 饶振华 龙凯
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: TLR2 TLR4 TLR4-siRNA 烟曲霉孢子 调控机制
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 108-113
• 分类号: R285.1
• 字数: 5556字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2012.02.003

摘要

目的 研究单核巨噬细胞RAW264.7受烟曲霉孢子刺激时,TLR2和TLR4信号通路发挥的作用,以及沉默TLR4基因后,对TLR2信号通路的影响.方法 利用RNAi技术将TLR4-siRNA转染RAW264.7细胞24h后给予烟曲霉孢子刺激12h,将细胞随即分为正常组(N组)、正常+烟曲霉孢子刺激组(N+Af组)、正常+TLR4-siRNA组[TLR4(RNAi)组]、正常+TLR4-siRNA+烟曲霉孢子刺激组[ TLR4(RNAi) +Af组],RT-PCR和Western blot法检测细胞受烟曲霉孢子刺激后TLR2、TLR4、MyD88 mRNA及TNF-α蛋白的表达变化.结果 (1)TLR4基因沉默前:与N组比较,N+Af组TLR2、TLR4、MyD88 mRNA及TNF-α蛋白表达量均显著升高(P＜0.05).(2)TLR4-siRNA( 100nmoL/L)转染RAW264.7细胞,沉默效率达83％.(3)TLR4基因沉默后:与N组比较,TLR4( RNAi)组TLR2、MyD88 mRNA的表达量均显著降低(P＜0.05);与N+Af组比较,TLR4( RNAi)+Af组的TLR2、MyD88 mRNA和TNF-α蛋白的表达量均显著降低(P＜0.05);与TLR4( RNAi)组比较,TLR4(RNAi)+ Af组MyD88 mRNA表达量显著升高(P＜0.05),而TLR2 mRNA及TNF-α蛋白表达量却无显著变化(P＞0.05).结论 RAW264.7细胞受烟曲霉孢子刺激时,TLR2和TLR4信号通路被激活,通过释放促炎细胞因子TNF-α发挥抗烟曲霉孢子刺激作用;当沉默TLR4基因后,TLR2信号通路不能被很好地激活来抵抗烟曲霉孢子对细胞的刺激作用,沉默TLR4基因下调了TLR2信号通路在RAW264.7细胞中的抗烟曲霉孢子刺激作用,可能TLR4较TLR2在抵抗烟曲霉孢子刺激时发挥更重要的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢小梅	江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室	66	799	17.0	26.0
2	谢卫华	江西中医学院药学院	26	48	3.0	5.0
3	苏明声	江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室	38	139	7.0	10.0
4	龙凯	江西中医学院药学院	22	274	9.0	16.0
5	朱根华	江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室	41	164	7.0	9.0
6	罗闳丹	江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室	19	100	7.0	9.0
7	饶振华	江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室	5	10	2.0	3.0