重组人半乳糖苷结合凝集素-9质粒的构建及表达

• 作者: 宰文欣 易路阳 艾永循 邱文洪 郭凯文 钟伟
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 半乳糖苷结合凝集素-9 构建 表达 重组质粒
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 177-180
• 分类号: R34
• 字数: 4000字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2012.02.011

摘要

目的 构建人半乳糖苷结合凝集素-9(Galectin-9)的真核表达质粒pGalectin-9,并检测其表达.方法 通过DNA重组技术和PCR方法 从人外周血单个核细胞克隆Galectin-9基因,插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,通过PCR、酶切及测序鉴定重组载体的正确性;采用脂质体转染技术将重组质粒pGalectin-9瞬时转染中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞,通过Western blot、RT-PCR和间接免疫荧光方法 检测Galectin-9的表达.结果 DNA测序和酶切鉴定证明Galectin-9基因正确克隆至pcDNA3.1(+)的多克隆位点;以重组质粒pGalectin-9瞬时转染CHO细胞,通过Western blot、RT-PCR和间接免疫荧光方法,在分子和细胞水平证实Galectin-9的表达.结论 成功构建pGalectin-9的重组质粒,并证实其在CHO细胞中可以成功表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭凯文	武汉科技大学医学院免疫学教研室	32	190	7.0	13.0
2	艾永循	江汉大学医学院免疫学教研室	50	185	8.0	11.0
3	邱文洪	江汉大学医学院免疫学教研室	31	133	7.0	11.0
4	易路阳	江汉大学医学院免疫学教研室	3	1	1.0	1.0
5	钟伟	江汉大学医学院免疫学教研室	4	39	3.0	4.0
6	宰文欣	江汉大学医学院免疫学教研室	1	0	0.0	0.0