骆驼蓬种子中一种具抗肿瘤活性蛋白的分离纯化及鉴定

• 作者: 刘东亮 吴婷 孙素荣 李阳 王燕 罗晶晶 马晓瑾
• 来源期刊: 天然产物研究与开发
• 学科: 医学
• 关键词: 骆驼蓬 脂转移蛋白 分离纯化 抗肿瘤 诱导凋亡
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1020-1025
• 分类号: R284.2
• 字数: 4196字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6880.2012.08.003

摘要

骆驼蓬种子经浸提、硫酸铵沉淀、CM阳离子交换层析和Superdex 75凝胶过滤层析分离纯化得到一种具有抗肿瘤细胞增殖活性的蛋白(命名为PhLTP),经Tricine-SDS-PAGE检测为单一蛋白条带,高效液相色谱检测其表观分子量为14.8 kDa左右,表明PhLTP是由两条相同的亚基组成的蛋白.采用Edman降解法对该纯化蛋白的N-末端进行氨基酸测序,其N-末端序列与其他植物非特异性脂转移蛋白相似.对PhLTP抗肿瘤活性进行研究,结果表明其对HeLa、Eca-109、MGC-9和BEL-7404细胞都有增殖抑制活性,其中对HeLa细胞增殖的抑制作用较好,并具有浓度和时间依赖性,其IC50为45 μg/mL.通过Hoechst33258染色观察细胞形态,发现PhLTP能诱导HeLa细胞发生凋亡.