带有穿膜结构域的转录因子蛋白Oct4和Sox2的融合表达

• 作者: 安群星 徐丽娟 陈晓鹏
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: Oct4 Sox2 穿膜结构域 融合表达 诱导性多能干细胞
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 页码范围: 680-682
• 分类号: Q78
• 字数: 2265字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.05.013

摘要

目的:克隆、表达及纯化带有穿膜结构域的转录因子蛋白Oct4和Sox2.方法:根据GenBank中的Oct4和Sox2基因序列,在其3'端引入穿膜结构域11R,并在其两端引入NdeⅠ和XhoⅠ酶切位点,进行全基因合成;将目的基因克隆至pET41a载体,进行酶切鉴定及测序;将所获阳性重组质粒转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,对表达产物进行Western印迹鉴定;最后用Ni-NTA亲和层析柱对所获目的蛋白进行纯化.结果:质粒酶切鉴定结果表明带有目的基因的重组质粒构建成功;SDS-PAGE结果显示有相对分子质量约42×103和38×103的特异性蛋白表达条带,经Western印迹证实为目的蛋白;用Ni-NTA亲和层析柱纯化后,得到均一的Oct4和Sox2目的蛋白.结论:得到带有穿膜结构域的转录因子融合蛋白Oct4和Sox2,为今后安全开展诱导性多能干细胞研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	安群星	第四军医大学第一附属医院输血科	61	151	7.0	9.0
2	陈晓鹏	第四军医大学第一附属医院输血科	13	25	3.0	4.0
3	徐丽娟	解放军307医院输血科	10	16	2.0	3.0