四川梅花鹿(CAG)n微卫星文库构建

• 作者: 刘梦瑶 刘武华 岳碧松 张修月 杨承忠 王洁清 王淋波 肖珍 高依敏
• 来源期刊: 四川动物
• 学科: 生物学
• 关键词: 四川梅花鹿 磁珠富集法 微卫星
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 734-739
• 页数: 6页
• 分类号: Q959.8|Q951.3
• 字数: 4820字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7083.2012.05.009

摘要

应用Dynal磁珠-生物素标记的微卫星探针与四川梅花鹿基因组酶切片段杂交,捕获200～750 bp含有微卫星序列的DNA片段,连接pMD18-T载体,再转化到感受态细胞JM109中以构建文库.通过PCR方法从(CAG)n文库中筛选阳性克隆,从576个转化子中获得了234个阳性克隆,对其全部进行序列测定,其中73个含有微卫星序列.除获得的目的微卫星序列(CAG)n外,还观察到(AG)n、(AT)n的重复序列.本研究表明,经过优化的磁珠富集法能够稳定、高效地获得四川梅花鹿微卫星标记.