目的 确定用硅胶柱层析纯化吡柔比星粗品的工艺条件.方法 采用薄层层析-硅胶柱层析法考察不同展开剂的层析效果,最优洗脱剂为二氯甲烷-甲醇;以吡柔比星的回收率和平均含量为评价指标,考察了流速、进样量与层析柱再生条件对层析粗分和精分的影响.结果 硅胶柱层析粗分吡柔比星的最佳工艺条件:以梯度洗脱方式洗脱,洗脱剂流速5.0 mL min-1,上样量16.6 mg mL-1柱体积,0.5 g L-1氢氧化钠溶液离线再生硅胶.吡柔比星质量分数经粗分后由原来的35.7%提高到90%左右,回收率为96.2%.硅胶柱层析精分吡柔比星的最佳工艺条件为洗脱剂二氯甲烷-甲醇比例为90∶10,流速3.5 mL min-1,上样量16.6 mg mL-1柱体积,甲醇再生3倍柱体积.吡柔比星质量分数经精分后由粗分的90%提高到99.6%左右,回收率为97.5%.结论 硅胶柱层析纯化吡柔比星所得产品符合质量要求.