RNAi沉默Survivin基因抑制人鼻咽癌细胞生长

• 作者: 于喜龙 倪凯茹 吾为一 武炜 王巍 申咏梅 石怡珍 荣光 黄宏
• 来源期刊: 苏州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: RNAi Survivin pGenesil-1-survivin 鼻咽癌 CNE2细胞
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 331-335
• 分类号: R739.63
• 语种: 中文

摘要

目的 观察RNA干扰沉默Survivin基因对人鼻咽癌CNE2细胞在体内外生长的抑制作用.方法 将Survivin特异性shRNA表达载体pGenesil-1 -survivin经LipofectamineTM 2000介导转染人鼻咽癌CNE2细胞,经G418筛选获得稳定转染的CNE2细胞,荧光显微镜和流式细胞仪检测细胞转染效率；逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测Survivin基因mRNA和蛋白表达水平；噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力的变化.以稳定转染细胞建立裸鼠荷瘤模型,观测瘤体积的变化,绘制移植瘤生长曲线.结果 流式细胞仪检测pGenesil-1 -survivin细胞转染百分率为(87.13 ±2.21)％；RT-PCR和Western blot结果显示,pGenesil-1 -survivin组对人鼻咽癌CNE2细胞Survivin mRNA和蛋白的抑制率分别为64.55％和51.24％,均较随机序列构建载体的阴性对照(pGenesil-1 -NC)组和空白对照组明显下调(均P＜0.05)；MTT结果显示,pGenesil-1 -survivin组细胞增殖能力明显较pGenesil-1 -NC组和空白对照组降低(均P＜0.05)；体内实验表明,pGenesil-1 -survivin组较pGenesil-1 -NC组和空白对照组能有效抑制BALB/C裸鼠人鼻咽癌的生长(均P＜0.05).结论 沉默Survivin基因可以有效抑制人鼻咽癌CNE2细胞在体内外的增殖,Survivin基因有望成为鼻咽癌基因治疗的有效靶点.