大豆血红蛋白基因lba转化根瘤菌工程菌株的构建

• 作者: 于海鹏 李海英 潘钰 蒙明明
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 土著大豆根瘤菌 大豆血红蛋白基因lba DNA重组技术 工程菌株 三亲本杂交
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 69-74
• 分类号: S144.3
• 字数: 3638字
• 语种: 中文

摘要

以土著大豆根瘤菌接种大豆幼苗45 d后获得的根瘤为材料,提取其总RNA并反转录成cDNA,采用同源序列克隆法扩增大豆血红蛋白基因lba编码区序列.利用DNA重组技术,将lba基因连到lac启动子的下游,利用带有发光酶标记基因luxAB的质粒载体pTR102构建表达载体pTR-Plac-lba.采用三亲本杂交的方式,将表达载体pTR-Plac-lba及作为对照的空载体pTR102分别转化土著大豆根瘤菌,获得根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-1ba)和SFH( pTR102).盆栽试验发现,接种SFH( pTR-Plac-lba)的大豆植株各生理指标明显高于接种SFH( pTR102)、土著根瘤菌以及未接菌的大豆植株各生理指标.试验证明,导入大豆血红蛋白基因lba的根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)对于提高大豆根瘤的固氮酶活性,增加大豆产量起到显著效果.