肿瘤坏死因子-α抗体对实验性结肠炎小鼠肠黏膜通透性的影响及机制

• 作者: 刁磊 刘晓昌 梅俏 许建明 陈茉莉 韩亮 黄健
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤坏死因子α 抗体 结肠炎 肠黏膜 细胞膜通透性 肌球蛋白轻链激酶
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 389-394
• 分类号: R322.4
• 字数: 3259字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1432.2012.06.008

摘要

目的 研究TNF-α抗体对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的实验性结肠炎小鼠肠黏膜通透性的影响及作用机制.方法 将18只C57BL/6J小鼠均分为健康对照组、模型对照组和TNF-α抗体组,其中模型对照组和TNF-α抗体组小鼠喂饲5％DSS溶液7d.TNF-α抗体组分别于造模第1、4天予TNF-α抗体(5 mg/kg)腹腔注射给药,健康对照组和模型对照组则以等量0.9％氯化钠溶液代替.造模7d后处死小鼠,期间每日进行疾病活动指数(DAI)评分.分别采用偶氮蓝法和异硫氰酸荧光素标记葡聚糖(FITC-D)法检测小肠黏膜通透性.取结肠肠段,光学显微镜下观察并行病理组织学评分.取部分回肠肠段,电子显微镜下观察.制备10％结肠和小肠黏膜匀浆,使用相应试剂盒测定结肠黏膜髓过氧化物酶(MPO)活性、TNF-α含量和小肠黏膜肌球蛋白轻链激酶(MLCK)含量.Western印迹法检测小肠黏膜MLCK表达水平.统计学处理采用组间单因素方差分析.结果 与健康对照组比较,模型对照组小鼠DAI逐日增高.与模型对照组比较,TNF-α抗体组DAI获改善.模型对照组小鼠回肠上皮细胞胞间连接复合体缩短、变宽,细胞间隙扩大.TNF-α抗体组小鼠回肠上皮细胞连接结构紧密程度较高.模型对照组小鼠病理评分和结肠黏膜MPO活性、TNF-α含量均高于健康对照组(P值分别=0.008、0.006、0.001),TNF-α抗体组则均低于模型对照组(P值分别=0.004、0.008、0.005),三组间比较F值分别=131.98、218.28、58.93.模型对照组小鼠肠壁中偶氮蓝和血清中FITC-D含量均高于健康对照组(P值分别=0.003和0.010),TNF-α抗体组则均低于模型对照组(P值分别=0.001和0.009),三组间比较F值分别=69.36和17.96.模型对照组小鼠小肠黏膜中MLCK含量[(71.10±7.52)ng/g]高于健康对照组[(18.56±9.92)ng/g,P＜0.01],TNF-α抗体组[(37.56±15.84)ng/g]则低于模型对照组(P=0.008),三组间比较差异有统计学意义(F=17.23).Western印迹检测显示,模型对照组小鼠小肠黏膜中MLCK表达水平高于健康对照组,TNF-α抗体组则低于模型对照组.结论 TNF-α抗体具有显著的抗结肠炎作用,可改善肠黏膜通透性,其机制可能与调控MLCK表达有关.