猪肺炎支原体DnaK蛋白质单抗的制备与鉴定

• 作者: 冯志新 刘茂军 熊祺琰 王海燕 白方方 白昀 缪芬芳 邵国青
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪肺炎支原体 DnaK蛋白质 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧兽医·水产养殖
• 页码范围: 1361-1366
• 页数: 6页
• 分类号: S852.62
• 字数: 4511字
• 语种: 中文

摘要

为了获得针对猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)DnaK蛋白质的单克隆抗体,利用Mhp全菌抗原免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备Mhp DnaK蛋白质的单抗.获得了3株可稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3A8、3E2及5D10.3株单抗的Ig重链均为IgG1,轻链均为K链.Western Blot分析结果显示,3A8与猪鼻支原体和Mhp均有反应,3E2和5D10只与Mhp反应,同时3E2和5D10能与Mhp 168株105代、J株、临床分离株XLW-1、XLW-2、XLW-3、XLW-4、AH、WX产生特异性反应.采用间接ELISA测得3株单抗腹水与DnaK重组蛋白质及Mhp 168全菌蛋白质反应效价均为1∶1 000 000.单抗3A8为针对Mhp和猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinitis,Mhr)共同抗原表位的单抗；3E2和5D10为猪肺炎支原体特异性抗体,且抗体效价高.