miR-210靶基因HBVSP2的鉴定

• 作者: 朱丽华 汤华 熊亚南 王梅梅 甄永占 章广玲 袁丽杰
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 质粒 miR-210 基因 表达 转染
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 501-505
• 分类号: R373
• 语种: 中文

摘要

目的:构建miR-210的过表达载体,利用双荧光蛋白报告基因分析系统验证miR-210的靶基因HBVSP2.方法:构建含有miR-210前体序列的miR-210的过表达质粒pcDNA3.1(+)/pri-miR-210;选取表达绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒pcDNA3/EGFP,将miR-210在HBVSP2上靶位点的一段特异性序列插入该质粒中,构建EGFP报告载体pcDNA3/EGFP-H BVSP2,并与miR-210ASO或者pcDNA3.1(+)/pri-miR-210及表达红色荧光蛋白质(RFP)的pDsRed2 -N1共同转染HEK293以及HepG2 2215细胞,用荧光分光光度计定量检测转染后提取的蛋白样品的荧光值.结果:共同转染pcDNA3/pri-miR-210和pcDNA3/ EGFP-HBVSP2质粒后,EGFP/RFP的表达量明显低于pcDNA3和pcDNA3/ EGFP- HBVSP2共转染组,差异具有统计学意义(P＜0.05).pcDNA3/pri-miR-210和pcDN A3/EGFP- HBVSP2组EGFP/RFP低于pcDNA3和pcDNA3/EGFP-HBVSP2共转染组(P＜0.05).共转染miR-210ASO和pcDNA3/EGFP-HBVSP2组EGFP/RFP的表达量高于共转染LacZ和pcDNA3/EGFP-HBVSP2组,差异具有统计学意义(P＜0.05).LacZ和pcDN A3/EGFP-H BVSP2组EGFP/RFP低于LacZ和pcDNA3/EGFP组(P＜0.05).结论:成功构建miR-210的过表达质粒pcDNA3.1(+)/pri-miR-210和含有miR-210靶位点的pcDNA3/EGFP- HBVSP2,HBVSP2可能是miR-210的直接靶基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤华	天津医科大学天津市生命科学中心	69	351	10.0	15.0
2	甄永占	河北联合大学临床医学院病原生物学教研室	24	84	6.0	7.0
3	朱丽华	河北联合大学临床医学院病原生物学教研室	40	126	6.0	8.0
4	袁丽杰	河北联合大学临床医学院病原生物学教研室	21	78	5.0	8.0
5	王梅梅	河北联合大学临床医学院病原生物学教研室	32	102	6.0	8.0
6	章广玲	河北联合大学临床医学院病原生物学教研室	38	123	6.0	8.0
7	熊亚南	河北联合大学临床医学院病原生物学教研室	29	85	5.0	7.0