绵羊类胚胎干细胞的分离与克隆

• 作者: 任卫青 何俊丹 和小娥 王新庄 陈亮
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊 胚胎干细胞 分离与培养 饲养层 克隆
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 788-792
• 分类号: S826.3
• 字数: 4415字
• 语种: 中文

摘要

从胚胎发育阶段、饲养层和培养体系等方面对影响绵羊类ES细胞分离、克隆效率的因素进行探讨。结果显示：致密桑葚胚和囊胚的ICM增殖率高于囊胚和孵化囊胚。绵羊类ES细胞在同源绵羊胎儿成纤维细胞（SEF）上生长比较缓慢,最终传代次数也低于小鼠胎儿成纤维细胞（MEF）组。培养液中同时添加胎牛血清（FBS）和Knock-out血清替代品（KSR）,绵羊类ES传至7代,添加了碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）后,最高可传至8代,而单纯添加KSR或FBS,分别传至4代和5代。对类ES细胞进行AKP染色、核型分析、体外分化试验,证实分离的类ES细胞符合ES细胞的主要特征,而且表达多潜能性细胞因子Nanog。由此认为,致密桑葚胚和囊胚更适合绵羊类ES细胞的体外分离和培养,而且MEF更适合于绵羊类ES细胞的分离传代,培养液中添加5%FBS和15%KSR,比较适合类ES细胞的分离传代,bFGF对绵羊类ES细胞的增殖具有促进作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王新庄	河南农业大学牧医工程学院	53	175	7.0	9.0
2	何俊丹	河南农业大学牧医工程学院	9	35	4.0	5.0
3	任卫青	河南农业大学牧医工程学院	10	35	4.0	5.0
4	陈亮	河南农业大学牧医工程学院	20	195	8.0	13.0
5	和小娥	河南农业大学牧医工程学院	8	35	4.0	5.0