中国美利奴超细型与哈萨克羊毛囊兴盛期皮肤组织消减cDNA文库的构建

• 作者: 张科 李晶 杨井泉 杨剑波 杨永林 沈敏 甘尚权 石国庆 高磊
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 经济
• 关键词: 抑制性消减杂交 中国美利奴羊 哈萨克羊 皮肤
• 年，卷（期）: 2012,（15）
• 所属期刊栏目: 畜牧·资源昆虫
• 页码范围: 3154-3164
• 分类号: F3
• 语种: 中文

摘要

[目的]筛选影响绵羊羊毛性状的重要候选基因,为研究羊毛性状形成的分子机制奠定基础.[方法]利用抑制性消减杂交技术构建中国美利奴超细型和哈萨克羊兴盛期皮肤组织间正、反向消减cDNA文库,并对差异基因进行测序和生物信息学分析；应用半定量RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR对部分差异基因进行鉴定.[结果]①从所构建绵羊皮肤组织的正、反向消减cDNA文库中分别获得153和143个ESTs,其中分别包括5和4个未知功能的ESTs,推测可能是新基因；对部分已知功能ESTs进行了GO聚类分析、通路分析和蛋白互作分析,结果显示粗、细毛羊之间存在一定差异；②文库中的3个差异基因KRTAP8-2、Trichohyalin和KRTAP3-2均能在皮肤中特异性地高表达,其中KRTAP8-2和Trichohyalin基因在中国美利奴超细型羊皮肤组织中的表达丰度分别是哈萨克羊的3.45和2.07倍,而KRTAP3-2基因在哈萨克羊皮肤组织表达丰度是中国美利奴超细型羊的1.87倍.[结论]成功构建了中国美利奴超细型和哈萨克羊皮肤组织间抑制性消减cDNA文库,初步筛选出一批可能影响羊毛性状的差异表达ESTs.