中国美利奴羊不同时期卵巢组织cDNA消减文库(SSH)的构建及序列分析

• 作者: 张文祥 李大全 林杉 赵宗胜 陈磊
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 中国美利奴羊 抑制消减杂交 发情 卵巢 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 研究资源与技术改进
• 页码范围: 642-650
• 页数: 9页
• 字数: 5427字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2014.05.013

摘要

季节性发情是制约我国绵羊(Ovis aries)产业发展的重要因素之一.母羊卵巢是重要的生殖器官,卵巢组织中周期性特异表达的基因很有可能直接或间接影响母羊的季节性发情.为探讨绵羊季节性发情的分子遗传机制,本研究采用抑制性消减杂交技术构建了发情期发情和未发情中国美利奴羊卵巢组织差异表达的消减cDNA文库.随机取样386个阳性克隆,经PCR鉴定获得有效克隆306个,测序后获得126条非冗余序列;用BLAST在线序列软件与GenBank、GenBank EST等数据库进行同源性序列比较,发现其中有21个未知序列,可能是和中国美利奴羊季节性产羔性状相关的新基因.从文库中选择差异表达的视黄酸受体应答1基因(RARRES1)、胸腺素β4基因(TMSB4X)、翻译延长因子基因(EEF1A1)、前胸腺素α基因(PTMA)以及12号和89号基因,在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、卵巢、输卵管、下丘脑和垂体中对上述6种基因进行组织表达谱分析.结果发现,TMSB4X、PTMA、EEF1A1和12号基因在上述组织中均有表达,而RARRES1和89号基因仅在中国美利奴羊卵巢组织中高表达.为了进一步验证研究结果,对RARRES1、TMSB4X、EEF1A1、PTMA、12号和89号基因进行实时定量PCR检测,结果显示,上述基因在发情中国美利奴羊卵巢组织中的表达量显著高于未发情绵羊.本研究筛选出调控中国美利奴羊季节性繁殖相关的候选基因,为进一步研究卵巢功能与绵羊季节性繁殖相互作用的分子机制提供了基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李大全	新疆石河子大学动物科技学院	20	168	7.0	12.0
2	赵宗胜	新疆石河子大学动物科技学院	31	230	8.0	14.0
3	陈磊	新疆石河子大学动物科技学院	17	155	7.0	12.0
4	林杉	新疆石河子大学生命科学学院	4	8	1.0	2.0
5	张文祥	新疆石河子大学动物科技学院	3	8	1.0	2.0