DHRS7对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及其在乳腺癌组织中的表达

• 作者: 倪劲松 宫鹏涛 张伟红 张西臣 李建华 李泽中 杨举 邢沈阳
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: DHRS7基因 过表达 干扰 细胞周期 乳腺肿瘤 MCF-7细胞
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 537-542,封3
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文

摘要

目的:探究DHRS7基因过表达和DHRS7特异性短发夹RNA (shRNA)重组质粒对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及DHRS7与乳腺癌浸润癌的关系,阐明DHRS7在乳腺癌发生、发展中的作用.方法:利用RT-PCR技术将DHRS7基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中,构建pcDNA3.1-DHRS7重组真核表达质粒.实验分为pcDNA3.1-DHRS7组、阴性对照组(pcDNA3.1组)、空白对照组和DHRS7-shRNA-pGenesil组,用Fugene HD转染试剂将各种质粒转染MCF-7细胞,采用RT-PCR和Westernblotting法检测各组MCF-7细胞中DHRS7的表达情况,流式细胞术分析细胞周期变化,免疫组织化学SP法检测乳腺原位癌和乳腺浸润癌组织中DHRS7蛋白的表达情况.结果:成功构建pcDNA3.1-DHRS7重组表达质粒.PCR和Western blotting结果显示,pcRNA-DHRS7组蛋白的表达量高于空白对照组(P＜0.05),DHRS7-shRNA-pGenesil组蛋白的表达量低于空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).流式细胞术显示,DHRS7表达上调使MCF-7细胞S期细胞增多(P＜0.05),DHRS7的表达下调使处于G2期的细胞增多(P＜0.05).免疫组织化学染色显示,DHRS7蛋白在原位癌中高表达,阳性表达率为100％(37/37);在乳腺浸润癌的表达明显降低,阳性率为18.9％(7/37),两者比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:DHRS7基因参与了MCF-7细胞细胞周期的调控过程,可以抑制细胞增殖,DHRS7蛋白的表达丢失可能促进乳腺癌浸润.