弓形虫β-酮脂酰ACP合成酶的表达及鉴定

• 作者: 傅行礼 吴亮 周红 姜旭淦 李礼 陈盛霞 鞠爱萍
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 FABZ 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 46-50
• 分类号: R382.5
• 字数: 3897字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2012.01.011

摘要

目的 构建刚地弓形虫β-酮脂酰ACP合成酶(FABZ)原核表达质粒并在大肠杆菌中表达,建立检测和定位虫体FABZ蛋白表达的方法.方法 运用RT-PCR技术扩增弓形虫RH株速殖子fabz基因,克隆至pET32a(+)载体,在大肠杆菌Rosetta中诱导表达.Ni-NTA亲合层析柱纯化重组FABZ蛋白并制备其兔多克隆抗体.采用免疫印迹(Western blotting)技术和间接免疫荧光技术(IFA)检测和定位FABZ在虫体内表达.结果 成功表达重组FABZ蛋白,并制备其多克隆抗体.Western blotting技术检测出虫体转运肽型FABZ蛋白(t-FABZ)和成熟型FABZ蛋白(m-FABZ),IFA技术检测出分布于核周内质网和顶质体的FABZ蛋白.结论 通过制备多克隆抗体,用Western blotting技术和IFA技术能检测和定位FABZ蛋白在虫体内表达,该方法在顶质体蛋白研究中具有较高的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈盛霞	江苏大学基础医学与医学技术学院	48	347	13.0	16.0
2	周红	江苏大学基础医学与医学技术学院	100	413	11.0	15.0
3	姜旭淦	江苏大学基础医学与医学技术学院	48	252	10.0	14.0
4	李礼	江苏大学基础医学与医学技术学院	4	27	3.0	4.0
5	吴亮	江苏大学基础医学与医学技术学院	51	245	11.0	15.0
6	傅行礼	江苏大学基础医学与医学技术学院	32	111	7.0	9.0
7	鞠爱萍	江苏大学基础医学与医学技术学院	3	8	1.0	2.0