羰基还原酶辅酶结合域位点突变对其不对称催化性能的影响

• 作者: Gaetano T. MONTELIONE 宫绪敏 徐岩 聂尧 肖荣
• 来源期刊: 催化学报
• 学科: 化学
• 关键词: 羰基还原酶 定点突变 催化活性 底物特异性 立体选择性
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 330-335
• 分类号: O643
• 字数: 4090字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1088.2012.10851

摘要

基于同源模型的比较和分析,发现羰基还原酶SCR1辅酶结合域P124和W125位点对辅酶NADPH的结合形成了一定的空间位阻效应.通过对该位点进行小侧基氨基酸的取代突变,该酶的底物专一性和立体选择性均发生了不同程度的改变,表明该位点是酶与辅酶有效结合的关键位点,而且它与辅酶结合的空间效应进一步影响了底物结合域活性中心对不同构型的底物及其对映体产物的亲和作用.在底物专一性方面,野生型酶对2-羟基苯乙酮和2-溴苯乙酮及其衍生物等底物表现出较高的催化活性,而突变株W125A,W125G,P124A/W125A和P124G/W125G对苯乙酮及其部分衍生物和2-辛酮等底物的催化活性均有所提高.对于酶的立体选择性,部分突变株发生了转化产物对映体构型反转的现象,突变株P124A/W125A和P124G/W125G催化还原2-羟基苯乙酮和4-氯乙酰乙酸乙酯均生成了(R)-型产物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐岩	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	233	3264	31.0	46.0
2	聂尧	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	34	150	7.0	10.0
3	宫绪敏	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	1	2	1.0	1.0