双尾彗星实验检测精子DNA完整性的方法学建立

• 作者: 崔云 张晓霞 陈建伟
• 来源期刊: 检验医学
• 学科: 医学
• 关键词: 双尾彗星实验 SSB DSB 男性不育
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 临床检验与血液学检验论著
• 页码范围: 21-25
• 分类号: R446.11
• 字数: 3527字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2012.01.007

摘要

目的 建立双尾彗星实验检测精子DNA完整性的方法学,并分析精子DNA损伤的类型.方法 利用中性和碱性双相单细胞凝胶电泳技术检测精子DNA损伤的情况.结果 双尾彗星实验共得到9种彗星形态,分别代表9种精子DNA损伤类型.利用H2O2和限制性内切酶AluI分别诱导单链DNA和双链DNA的产生.随着H2O2浓度逐渐增加,单链DNA的断裂逐渐增多,显微镜下可见含Y轴彗星尾的精子数逐渐增多,差异有统计学意义(P＜0.05).同样,随着AluI消化时间的延长,双链DNA的断裂增多,显微镜下可见含X轴彗星尾的精子数增多,差异有统计学意义(P＜0.05).另外,我们还发现男性不育组和有正常生育能力组的DNA单链损伤碎片指数(SSB-DFI)差异无统计学意义,而男性不育组的DNA双链损伤碎片指数(DSB-DFI)却显著高于正常生育能力组(P＜0.05).结论 双尾彗星实验能够区分精子DNA损伤是单链损伤还是双链损伤,为评估男性的生育能力提供更加深入、有力的实验室依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张晓霞	宁波市中医院检验科	7	48	4.0	6.0
2	陈建伟	宁波市中医院检验科	5	27	3.0	5.0
3	崔云	宁波市中医院男科	6	47	4.0	6.0