生长因子受体结合蛋白2在人类真核翻译延长因子1A2促进胰腺癌发生发展中的作用

• 作者: 胡端敏 许朝 诸琦
• 来源期刊: 中华消化杂志
• 关键词: 胰腺肿瘤 GRB2接头蛋白 缩氨酸延长因子1 基因表达 转染
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 838-842
• 页数: 5页
• 字数: 3161字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-1432.2012.12.009

摘要

目的 明确生长因子受体结合蛋白2(GRB2)在人类真核翻译延长因子1A2(EEFlA2)促进胰腺癌发生发展中的作用.方法 用腺病毒质粒Ad5/F35-EEFl A2转染胰腺癌细胞株SW1990(EEFlA2低表达),应用小干扰RNA(siRNA)技术下调胰腺癌细胞BxPC-3 (EEF1A2高表达)中EEFlA2的表达水平,用RT-PCR及Western印迹方法检测SW1990和BxPC-3细胞株处理前后GRB2的表达.化学合成GRB2特异高效的siRNA干扰片段,干预胰腺癌细胞BxPC-3后通过MTT和Transwell实验观察BxPC-3细胞增殖和运动能力的变化.统计学处理采用单因素方差分析.结果 腺病毒Ad5/F35-EEF1A2转染人胰腺癌细胞株SW1990后,GRB2的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(F=5.67和6.39,P均＜0.05).EEF1A2-siRNA抑制BxPC-3胰腺癌细胞EEF1A2表达后,GRB2的mRNA和蛋白表达水平均明显下调(F=-6.59和4.69,P均＜0.05).BxPC-3在被转染siRNA-GRB2后,MTT结果显示72 h时,siRNA-GRB2组吸光度值为1.22±0.14,与阴性对照组和空白对照组(1.42±0.15和1.39±0.15)相比,差异有统计学意义(F=6.63,P＜0.05).Transwell实验结果显示siRNA GRB2组细胞侵袭能力减弱,24 h后穿膜细胞数为(24.10±4.25)个,与阴性对照组[(54.72±5.24)个]及空白对照组[(51.26±6.23)个]相比,差异有统计学意义(F=55.00,P＜0.05).结论 GRB2是EEF1A2促进胰腺癌发生发展的关键分子.