EphA2调控头颈部鳞状细胞癌血管新生及转移的体内实验

• 作者: 余长云 刘勇 周小娟 张欣 田勇泉 肖健云 谭平清 邱元正 黄东海
• 来源期刊: 中华耳鼻咽喉头颈外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 头颈部肿瘤 癌,鳞状细胞 受体,EphA2 肿瘤转移 新生血管化,病理性
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 53-57
• 分类号: R323.1
• 字数: 4707字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2012.01.014

摘要

目的 研究EphA2对头颈部鳞状细胞癌(简称鳞癌)血管新生及颈淋巴转移的影响.方法 利用慢病毒介导的短发夹RNA( short hairpin RNA,shRNA)沉默EphA2在高转移性头颈鳞癌细胞株M2中的表达,嘌呤霉素筛选稳定克隆,反转录PCR及Western blot技术检测EphA2沉默效果；构建头颈鳞癌高转移动物模型,通过HE染色验证其成瘤及颈淋巴转移情况；免疫组织化学技术检测移植瘤微血管密度,Western blot技术检测移植瘤标本中EphA2及血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况.结果 筛选出EphA2基因稳定沉默的M2细胞(定义为M2 EphA2 RNA+即实验组),并成功构建头颈鳞癌高转移动物模型,成瘤率达100％.25 d后,实验组移植瘤体积为(430.7±190.0) mm3(x±s,以下同)较对照组的(1179.0 ±289.4) mm3明显减少(t =5.597,P＜0.01),质量显著减轻(t=-4.560,P＜0.05),且双侧颈淋巴转移率明显降低(Mann-Whitney U=10.0,P＜0.05).Western blot 显示实验组移植瘤组织中EphA2及VEGF蛋白表达显著下调,免疫组织化学技术发现实验组瘤体微血管密度为(4.74±0.67)个/视野,显著少于对照组的(14.17±0.59)个/视野(t=26.751,P＜0.01).结论 EphA2沉默能抑制头颈部鳞癌细胞的生长及转移,并能明显减少头颈部鳞癌组织内的肿瘤新生血管,且该肿瘤新生血管的抑制可能与促血管生成因子VEGF的减少有关.