传染性法氏囊病病毒感染细胞内源性microRNA表达差异分析

• 作者: 朱向东 欧阳伟 毕振威 王永山 王永强 王笑梅 范红结
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性法氏囊病病毒(IBDV) microRNA(miRNA) 基因芯片 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 329-336
• 分类号: S852.65|Q78
• 语种: 中文

摘要

细胞内源性microRNA（miRNA）在宿主与病原相互作用过程中发挥着重要的调节功能。为了分析细胞内源性miRNA与传染性法氏囊病病毒（IBDV）的相互作用,用IBDV弱毒和强毒分别感染鸡胚成纤维细胞（CEF）和SPF鸡,24h后,取感染CEF和法氏囊组织,提取细胞总RNA,用Hy3/Hy5双色荧光标记,与miRNA芯片杂交,进行芯片内标准化、芯片间标准化、表达差异比较以及聚类分析。结果显示：在IBDV弱毒感染的CEF中,有17个细胞内源性miRNA表达上调,17个miRNA表达下调;在IBDV强毒感染的鸡法氏囊组织细胞中,有30个细胞内源性miRNA表达上调,18个miRNA表达下调。根据表达差异显著的miRNA序列设计引物,用荧光定量RT-PCR方法验证芯片检测结果,2种方法的检测结果一致。结果表明,IBDV感染可诱导细胞内源性miRNA表达变化,这些上调或下调的miRNA能调控细胞内多种代谢和信号传导途径发生异常,引起细胞及组织器官发生病理学变化。