大白菜非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的优化

• 作者: 原玉香 姚秋菊 张强 张晓伟 朴凤植 梁宝萍 梁爽 蒋武生 赵艳艳
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 非变性聚丙烯酰胺 聚合速度 贮存液 TEMED与APS配比
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 园艺·林学
• 页码范围: 129-132,136
• 分类号: Q784
• 字数: 4068字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-3268.2012.05.033

摘要

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的检测效果受到凝胶聚合速度、片段迁移率等多种因素影响.以大白菜为供试材料,研究比较了凝胶聚合速度及PCR产物在不同浓度凝胶上的检测效果.不同浓度的凝胶是由2种[40％(19∶1)和30％(29∶1)]贮存液分别配制的4种浓度(5％,7％,9％,11％).结果表明,在4～30℃,凝胶聚合速度随温度的升高而加快；APS保持不变,不同温度下TEMED∶APS合适配比也不同:4℃(冬季)时,TEMED/APS的合适配比是1∶10,25℃(春秋)、30℃(夏季),选择1∶20的配比为宜；2种不同贮存液配制的相同浓度凝胶检测效果不同,30％(29∶1)优于40％(19∶1),由前者配制7％的凝胶上DNA片段分离效果好,带型清晰,分辨率高.