敲低miR221/222上调PUMA促进胶质母细胞瘤U251细胞凋亡的体内研究

• 作者: 康春生 张春智 杨卫东 浦佩玉 王广秀 王广舜
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经胶质瘤 miR-221 miR-222 PUMA 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2012,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 762-766
• 分类号: R730.264
• 字数: 3960字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2012.08.002

摘要

目的 探讨敲低miR-221/222表达上调PUMA对U251人脑胶质母细胞瘤凋亡的影响及其机制. 方法 5周龄BALB/c裸鼠左侧鼷部皮下接种1 mm3移植胶质瘤瘤块建立裸鼠移植瘤模型,1周后接受治疗(转染无义序列组、反义miR-221/222共转染组分别瘤内注射无义对照序列、反义miR-221/222寡核苷酸,对照组注射等量溶剂,每组8只).治疗开始至28 d观察肿瘤的生长情况,观察期结束时取肿瘤组织HE染色检测病理学改变；荧光原位杂交(FISH)、实时定量PCR检测肿瘤组织miR-221、miR-222的表达;TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡,免疫组化染色、Western blotting检测肿瘤组织凋亡相关蛋白PUMA、bax和bcl-2、p53的表达. 结果 治疗后6～28 d反义miR-221/222共转染组移植瘤的体积明显低于对照组和转染无义序列组,差异有统计学意义(P＜0.05)；与转染无义序列组及对照组比较,反义miR-221/222共转染组肿瘤组织miR-221、miR-222 mRNA的表达水平下降；HE染色显示反义miR-221/222共转染组肿瘤组织异型性减低,新生血管数减少;与对照组和转染无义序列组比较,反义miR-221/222共转染组肿瘤组织的凋亡指数较高,差异有统计学意义(P＜0.05);免疫组化染色检测显示与对照组和转染无义序列组比较,反义miR-221/222共转染组PUMA、bax表达阳性率较高,bcl-2表达阳性率较低,差异有统计学意义(P＜0.05); Western blotting检测显示与对照组和转染无义序列组比较,反义miR-221/222共转染组肿瘤组织PUMA和bax蛋白表达升高,bcl-2表达下降,而p53表达无明显变化. 结论 反义miR-221/222治疗可通过上调PUMA蛋白表达来诱导U251胶质瘤细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张春智	天津市环湖医院神经外科	17	69	6.0	7.0
2	王广舜	天津市宝坻区人民医院肿瘤科	11	46	3.0	6.0