胃蛋白酶原Ⅱ单抗制备及夹心ELISA的初步建立

• 作者: 刘旺根 孙青芸 张怡青 张红绪 景建洲 李恒思 李玉林 王云龙 王继创 董彩文
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 胃蛋白酶原 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 56-59
• 分类号: S854.43
• 字数: 2652字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2012.04.013

摘要

制备配对胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)单抗,建立人血清中胃蛋白酶原Ⅱ夹心ELISA检测方法.用胃蛋白酶原Ⅱ免疫Balb/c小鼠,制备免疫脾细胞,与SP2/0融合,用HAT培养基进行筛选培养,间接ELISA检测阳性克隆,对阳性孔进行多次单克隆化,选出效价高、分泌性能稳定的杂交瘤细胞,制备腹水并进行纯化.进行单抗配对,建立胃蛋白酶原Ⅱ双抗体夹心检测方法.获得1D8、1C6、2H11、2E3等4株杂交瘤,经配对试验,确定1D8、2H11可作为夹心ELISA检测PGⅡ的单抗.成功制备出配对单抗,初步建立了PGⅡ双抗体夹心ELISA方法.