舌鳞癌Tca 8113细胞过表达Twist1促进其侵袭

• 作者: 代炜 周青 张恩礁 段维轶
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Twist1 真核表达载体 免疫荧光 侵袭转移
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1246-1249
• 分类号: R392-33|R739.81
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人Twist1真核表达载体并检测舌鳞癌Tca8113中过表达Twist1与侵袭转移的关系.方法:从Tca8113细胞中提取mRNA,反转录为cDNA,利用特异PCR引物扩增Twist1基因,将其定向克隆至pcDNA3.1-myc-hisA载体,融合蛋白表达载体命名为Myc-Twist1.将Myc-Twist1转染到Tca8113细胞系中,Western blot法检测蛋白表达.共聚焦激光扫描显微镜观察Twist1在Tca8113细胞中的定位.荧光素酶报告基因检测Myc-Twist1对上皮性钙粘素(E-cadherin)启动子活性调节.Transwell检测稳定表达Myc-Twist1的Tca8113细胞侵袭能力.结果:成功构建真核表达载体Myc-Twist1,Western blot法检测到Myc-Twist1融合蛋白表达.人Twist1主要定位于细胞核,少量定位于细胞质.Twsit1明显抑制E-cadherin的启动子活性,增强细胞侵袭能力.结论:Twist1能通过调控E-cadherin的表达促进Tca8113细胞的侵袭.