巴西橡胶树橡胶粒子蛋白质的16-BAC/SDS-PAGE双向电泳及质谱分析

• 作者: 代龙军 康桂娟 曾日中 段翠芳 聂智毅 项秋兰 黎瑜
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 巴西橡胶树 橡胶粒子 蛋白质 16-BAC/SDS-PAGE双向电泳 质谱分析
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 2328-2338
• 分类号: S794.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.11.023

摘要

[目的]分析巴西橡胶树(Hevea Brasiliensis Müll.Arg.)橡胶粒子的蛋白质构成,探索未知的橡胶粒子蛋白质.[方法]采用16-BAC/SDS PAGE双向电泳分离橡胶粒子蛋白质,采用MALDI/TOF-TOF质谱技术进行蛋白质鉴定；此外,利用磺基异硫氰酸苯酯(SPITC)化学辅助质谱测序法进行肽段的从头测序,获得未知蛋白质肽段的氨基酸序列.通过搜索橡胶树胶乳转录组测序获得的EST数据库,获取已知部分氨基酸序列蛋白质的全序列,或通过部分肽段获取为未知蛋白质编码的EST序列.[结果]获得了橡胶粒子蛋白质的16-BAC/SDS-PAGE双向电泳图谱,鉴定了17个橡胶粒子蛋白质；获得1个小橡胶粒子蛋白(small rubber particle protein,SRPP)亚家族成员SRPP (gi｜37622210)的完整氨基酸序列以及1个橡胶延伸因子(rubber elongation factor,REF)亚家族新成员(hbREF2)的C端87个氨基酸残基序列,此蛋白质的氨基酸序列与已知的REF(gi｜38122474)具有高度的相似性.[结论]采用16-BAC/SDS-PAGE双,向电泳有效地分离了橡胶粒子蛋白质,展现了橡胶粒子蛋白质的相对含量,研究结果表明构成橡胶粒子的主要蛋白质组分是REF和SRPP亚家族蛋白质.橡胶粒子的蛋白质组分的全面鉴定,将有助于揭示橡胶粒子的生物学功能.