摘要:
目的 观察中药单体与含药血清对氧化损伤大鼠晶状体上皮细胞( LECs)中Bcl-2及Bax表达的干预作用异同,探讨内障丸加减方预防或延缓白内障发生发展的作用机制.方法 取3只8周龄大鼠,予内障丸加减方45 g/(kg·次)灌胃,每日2次,连续3d,末次灌胃后1h,制备含药血清.以Medium199培养液30 mL+青霉素注射液20万U/L+链霉素注射液25万U/L制备成培养液5份,分别为空白对照组、模型组、槲皮素组、含药血清组及空白血清组,除空白对照组外,其余各组培养液以30%过氧化氢(H202)溶液诱导Fenton反应.然后含药血清组及空白血清组分别加入相应的血清,将各培养液置于无菌6孔培养板中,每孔含培养液3 mL.另取15只4~5周龄大鼠随机分为5组,分别为空白对照组、模型组、槲皮素组、含药血清组及空白血清组,每组各3只.无菌操作提取晶状体,将晶状体放入含有相应培养液的培养孔中,每孔3枚.经24h后,取囊膜铺片,以免疫组化法检测LECs的凋亡相关基因Bcl -2及Bax表达,在光学显微镜下观察Bcl -2及Bax的表达情况.结果 空白对照组、槲皮素组及含药血清组Bcl -2及Bax表达与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),空白血清组与模型组Bcl -2及Bax表达无统计学意义(P>0.05).空白对照组、槲皮素组及空白血清组Bcl -2及Bax表达与含药血清组比较差异有统计学意义(P<0.05).过氧化氢诱导的大鼠LECs凋亡,模型组和空白血清组Bax的表达上调明显,而Bcl -2的表达下调.槲皮素及含药血清组与模型组及空白血清组相比,LECs的Bcl -2的表达显著上调,而Bax的表达明显下调.含药血清组比槲皮素组更能有效上调Bcl -2的表达,降低Bax的表达.结论 内障丸加减方的血清活性成分能有效保护LECs的细胞结构,上调Bcl -2基因的表达,抑制细胞凋亡.